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    您的位置:首頁 > 產品中心 > 細胞分類 > 細胞系 > NIH/3T3NIH/3T3 小鼠胚胎細胞/鏡像綺點(iCell)

    產品中心
    產品名稱:

    NIH/3T3 小鼠胚胎細胞/鏡像綺點(iCell)

    產品型號: NIH/3T3
    產品時間: 2025-07-09
    描述:NIH/3T3 小鼠胚胎細胞/鏡像綺點(iCell)
    NIH/3T3 小鼠胚胎細胞介紹
    與原始的隨機交配3T3和近交系BALB/c 3T3建株方法一樣,NIH/3T3,是從NIH Swiss小鼠胚胎培養物中建立的高度接觸抑制的連續細胞株。為了培育在形態學特征上更適合于進行轉化分析的亞株,建立的NIH/3T3細胞株又進行了五輪以上亞克隆。這株細胞對DNA轉化及轉染研究十分有用。

    產品介紹

    NIH/3T3 小鼠胚胎細胞/鏡像綺點(iCell)介紹

    與原始的隨機交配3T3和近交系BALB/c 3T3建株方法一樣,NIH/3T3,是從NIH Swiss小鼠胚胎培養物中建立的高度接觸抑制的連續細胞株。為了培育在形態學特征上更適合于進行轉化分析的亞株,建立的NIH/3T3細胞株又進行了五輪以上亞克隆。這株細胞對DNA轉化及轉染研究十分有用。檢測表明肢骨發育畸形病毒(鼠痘)陰性。

    NIH/3T3 小鼠胚胎細胞/鏡像綺點(iCell)特性

    1) 來源:胚胎
    2) 形態:成纖維細胞,貼壁生長
    3) 含量:>1x106 個/mL
    4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
    5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

     

    運輸和保存

    可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:

    (1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;

    (2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

    (3)收到細胞后請拍照,3天內如果發現污染,請及時拍照與我們聯系。

     

    細胞用途:僅供科研使用。

     

    細胞接受后的處理:

    1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。

    2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。

    3) 棄去T25瓶中的培養基,添加6ml新的*培養基。

    4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。

    5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。

                           

    細胞培養步驟

    一.培養基及培養凍存條件準備:

    1) 準備;DMEM+10%小牛血清+1%P/S+1%neaa+1%丙酮酸鈉+1%谷氨酰胺
    2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
    3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

    二. 細胞處理:

    1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

    2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

    對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

    1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

    2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

    3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

    4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

    注:di一次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據客戶需要自己決定。

    3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。

    下面T25瓶為類;

    1,細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

    2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。

    3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

    鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產品和服務介紹:

            一、原代細胞服務:
                   各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
                   多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
                   原代細胞分離和培養相關試劑、kit、培養基添加劑等
                   原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務

            二、細胞系服務:
                   細胞株/系培養、增殖、凍存和相關說明書
                   細胞系培養過程的技術指導
                   細胞系培養基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等

            三、iPS細胞服務:
                   iPS細胞基礎培養(有滋養層or無滋養層)
                   iPS細胞增殖及冷凍保存
                   iPS基礎培養技術實習
                   新藥及實驗儀器上市前評估

            四、其他技術外包服務、客戶定制服務等

    鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司

     

    序號

    產品名稱

    貨號

    規格

    售價

    備注

    1

    培養基1640

    icell-0002

    500ml

    140

     

    2

    培養基DMEM

    icell-0001

    500ml

    140

     

    3

    培養基DMEM/F12

    icell-0005

    500ml

    140

     

    4

    內皮細胞培養基ECMsciencel

    icell-0016

    500ml

    2280

     

    5

    動物上皮細胞培養基Epicm-a

    icell-0015

    500ml

    1980

     

    6

    上皮細胞培養基Epicm

    icell-0017

    500ml

    1980

     

    7

    Mccoy’s 5A 培養基

    icell-0011

    500ml

    160

     

    8

    MEM培養基

    icell-0012

    500ml

    140

     

    9

    FBS北美胎牛血清

    GIBCO   16000-044

    500ml

    6800

     

    10

    FBS墨西哥胎牛血清

    10437-028

    500ml

    5616

     

    11

    馬血清

    gibco.16050122

    500ml

    1489

     

    12

    DMSO

    sigma-D2650

    100ml

    1520

     

    13

    PBS片劑(1000ml)

    09-9400-100

    100片

    4170

     

    14

    PS雙抗(進口)

    15140-122

    100ml

    452

     

    15

    胰蛋白酶

    25200-072

    500ml

    665

     

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